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HK-2 人腎皮質近曲小管上皮細胞?培養基及培養凍存條件準備
點擊次數:682 更新時間:2024-01-08

HK-2 人腎皮質近曲小管上皮細胞培養基及培養凍存條件準備:


1)準備 角質細胞無血清培養基或者 Defined K-SFM  ,添加對應因子,1% P/S 來培養細胞。


備注:Defined K-SFM培養液包含兩個組份:基礎培養基1瓶+生長因子1管


2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。


3)凍存液:培養液92.5%,7.5%DMSO,現用現配。


4)傳代比例:如果沒有特別說明,收到細胞后的第一次傳代一般是1:2。傳代周期:4-6天,換液頻率:每周 2-3次。


備注:


1. 該細胞貼壁較慢,為使細胞貼壁更容易,建議可提前在培養皿/培養瓶中鋪0.25%的明膠溶液,并于貼壁24~48小時后再進行后續操作。


2. 該細胞生長不能過密,請在生長密度80%時進行傳代。


3.使用0.05%消化細胞,由于Defined K-SFM為無血清培養液無法終止消化,所以消化完成后要通過離心(建議125xg離心5到10分鐘)去除或者用帶10%血清的培養基來終止消化,再進行后續操作。


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